血清替代物,UltroserTM G

中文名稱：血清替代物 產(chǎn)品規(guī)格 ：20ml 產(chǎn)品品牌：UltroserTM G 交 貨  期：2-3天 動物細(xì)胞培養(yǎng)血清替代品 1. 簡介 Ultroser G 是一種血清替代品，用于替代動物細(xì)胞培養(yǎng)基中的胎牛血清(FBS)。 Ultroser G 血清替代品已成功應(yīng)用于許多貼壁細(xì)胞的體外培養(yǎng)。也可用于產(chǎn)前診 斷中對羊水細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，從而進(jìn)行染色體核型研究。Ultroser G 的生物活性是 FBS 的 5 倍。該產(chǎn)品以凍干粉形式提供，相當(dāng)于 20mL 的替代品。 2. 準(zhǔn)備和溶解 將凍干粉溶解在 20mL 無熱源的無菌蒸餾水（注射用水）中，具體操作如下： （1）打破膠囊的頂端，打開小瓶； （2）加入適當(dāng)體積的注射用水： - 首次打開瓶塞后，使用無菌且無熱源的吸頭進(jìn)行添加， - 或者使用無菌且無熱源的注射器穿過瓶塞進(jìn)行添加 兩種方式均需在無菌環(huán)境下操作 （3）讓凍干粉溶解 10-15 分鐘。輕輕搖動試劑瓶或使用移液器/注射器連續(xù)吹吸 以加速粉末溶解。 溶解后的溶液應(yīng)為透明的粉紅色。為保證安全，溶液應(yīng)使用 0.2μm 孔徑的無菌濾 膜過濾后使用。這一過程不會導(dǎo)致活性損失。 3.濃縮 粉末溶解之后，Ultroser G 血清替代品的生物活性是 FBS 的 5 倍。使用濃度應(yīng)為 0.5%-4%（對應(yīng) FBS 濃度為 2.5%-20%），通常使用 2%的濃度（對應(yīng) FBS 濃度為 1 / 32 / 3 10%）。將 2%的 Ultroser G 血清替代品和 98%的基礎(chǔ)培養(yǎng)基混合，以制備標(biāo)準(zhǔn)濃 度為 2%的溶液。對于不同種類的細(xì)胞，應(yīng)對 0.5%-4%的使用濃度分別評估以確 定細(xì)胞生長的最佳條件。對細(xì)胞生長的影響并不總與 Ultroser G 血清替代品的濃 度成正比，同時與在相同條件下使用 FBS 得到的結(jié)果也無關(guān)聯(lián)。 4. 培養(yǎng)基 通常用于培養(yǎng)的是含 FBS 的培養(yǎng)基（如 MEM 等）。然而，建議使用如 HAM 的 F12， DMEM，IMDM 或 RPMI 等富集培養(yǎng)基。 5. 培養(yǎng)效果 培養(yǎng)效果與使用 FBS 的效果相同。Ultroser G 血清替代品含有吸附因子。因此， 可以用于在添加細(xì)胞前對塑料培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基進(jìn)行預(yù)培養(yǎng)。然而，對于一些難 以生長的細(xì)胞類型，或許需要在塑料培養(yǎng)皿中涂抹如下產(chǎn)品中的一種：多聚賴氨 酸、膠原蛋白、細(xì)胞外基質(zhì)或纖維連接蛋白等粘附因子，以提高細(xì)胞的粘附力。 6. 胰蛋白酶酶解 組織和單層細(xì)胞的胰蛋白酶酶解技術(shù)與使用 FBS 完全相同。然而，酶解時間應(yīng)盡 可能縮短以降低對細(xì)胞的損傷。為了去除殘余的胰蛋白酶，在分散細(xì)胞前可能需 要添加濃度為 0.5-1mg/mL 的胰蛋白酶抑制劑，如大豆提取物或抑肽酶。如細(xì)胞 仍聚集在一起，可使用 40 μm 的細(xì)胞篩過濾細(xì)胞懸液。 7. 細(xì)胞轉(zhuǎn)移 可采用兩種技術(shù)從含有 FBS 的培養(yǎng)基中轉(zhuǎn)移細(xì)胞進(jìn)行亞培養(yǎng)。 ▪ 將細(xì)胞直接轉(zhuǎn)移至含有 Ultroser G 血清替代品的培養(yǎng)基中 ▪ 或經(jīng)過適應(yīng)期后，在幾次傳代中逐漸減少血清的添加量： - 第一次傳代：50%含血清（MSS）的培養(yǎng)基+50%含最適濃度 Ultroser G 血清 替代品的培養(yǎng)基 - 第二次傳代：25% MSS+75%MSU - 第三次傳代：10% MSS+90%MSU - 第四次傳代：100%MSU 第二種技術(shù)可以使細(xì)胞更適應(yīng)新的培養(yǎng)基。 在接種細(xì)胞前，測定培養(yǎng)基的最終 pH 值，如必要，將其調(diào)整至 7.2±0.1。可加入 碳酸氫鈉或合成緩沖液(HEPES)以提高介質(zhì)的緩沖能力。 8. 儲存 Ultroser G 血清替代品以凍干粉形式提供。該產(chǎn)品在室溫下運(yùn)輸且必須在 2-8℃下3 / 3 保存。一經(jīng)復(fù)溶，溶液應(yīng)盡快使用�；�?qū)⑷芤悍盅b于-20℃凍存，可保存數(shù)周。 應(yīng)避免反復(fù)凍融。 9. 參考資料 Le clonage des cellules du liquide amniotique, aide dans l'interprétation des mosaïques chromosomiques en diagnostic prénatal. Boué, J., et al., Ann. Genet., 1979, 22 No. 1, 3. 10. 制造商 Pall BioSepra, a Division of Pall France SAS, 48 avenue des Genottes, 95800 Cergy-Saint Christophe, 法國.

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